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无机抗菌材料的性能测试方法

发表时间:2019-03-15  |  点击率:389

主要讲下用恒温培养箱进行抑菌测试:

抑菌圈法

(1)依次准确称取3g牛肉稿、10g蛋白冻、5gNaCl、15g~20g琼脂放入烧杯中。在上述烧杯中先到场少于所需要的水量,用玻璃棒搅匀,然后在石棉网上加热使其溶解。将药品完全溶解后,补充水到1L。在未调节pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH,如果偏酸性,用滴管向培养基中逐滴到场lmol/LNaOH溶液,边加溶液边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达到7.6。反之,用lmol/LHCl进行调节。

(2)按尝试要求,可将配制的培养基分装入锥形瓶和试管内。培养基分装完毕后,在锥形瓶口和试管口塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能。加塞后,将全部锥形瓶和试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

(3)将上述培养基以0.103MPa,121℃,20min高压蒸汽灭菌。将灭菌的试管培养基冷却至50℃左右,将试管口端搁在试管架上,搁置的斜面长度不超过试管总长的一半为宜。将灭菌培养基放入37℃的温室中培养24h,以查抄灭菌是否彻底。制得斜面培养基若干,供接种培养细菌备用。

(4)将细菌接种在斜面培养基上,在37℃下培养16-24h后转接一次,在37℃下培养16-20h。

(5)将培养皿、试管、镊子、玻璃杯、玻璃棒、移液管等经清洗后放入电热恒温干燥箱烘干杀菌,在160℃下灭菌2h。

(6)依次取无菌磷酸盐缓冲液10mL放入灭菌的试管中,在斜面培养基上取一环菌放入个试管中混匀后取出1mL放入第二个试管,此时菌液浓度为10,如此反复进行,使菌液浓度稀释至10%。

(7)取1mL10菌液滴入到已灭菌的平皿中,取冷却至50℃左右的营养琼脂20mL左右倒入平皿中并与菌液混匀。
(8)待营养琼脂凝固后,取压制成形的抗菌样品放入平板中央(以不破坏琼脂平板为宜),把培养基放入紫外灯下光照1h,培养基和紫外灯的距离大约20cm。
(9)将光照后的培养基放入37℃恒温培养箱中倒置培养24h后观察抑菌圈大小,按互成45℃的4个直径方向测量透明抑菌圈直径,计算平均值。

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