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SH-SY5Y的培养

发表时间:2021-05-24  |  点击率:284

       将完全培养基吸出保存在4℃环境下,培养瓶内留有5ml供细胞生长。经观察,SY5Y的密度在80%左右,放至二氧化碳培养箱(37℃,5%二氧化碳)培养。

       使用含有EDTA的胰酶消化进行1:3传代,约30S细胞成块脱落,这说明消化过度。含有EDTA的胰酶消化能力强,下次传代应注意缩短消化时间。消化过度,细胞成块脱落,不易吹散。

       传代后,成团的细胞不利于营养物质的获取和代谢废物的排出,严重影响增殖,甚至导致凋亡。下午5时观察,细胞均已铺开贴壁,密度较大,状态良好。为保险起见,在最初的培养中,使用的培养是完全培养液。使用完毕后,得自己配:1640+15%灭活FBS+1%双抗+1%谷氨酰胺。将FBS在二氧化碳培养箱放置35分钟进行灭活。本来FBS冻存的,需在室温下恢复室温,方可放置于二氧化碳培养箱中。将泡酸的玻璃培养瓶、滴管、200ml玻璃瓶和尖底玻璃离心管清洗并高压后风干。

 

       先容下SH-SY5Y:中文名称人神经细胞母细胞瘤细胞,该细胞分化低、繁殖快、细胞形态、生理和生化功能与正常神经细胞相似。被广泛应用于神经系统疾病发病机制研究和药物作用机制方面的研究

       [1]。该细胞可以产生儿茶酚胺和多巴胺,磁刺激的频率和时间显著影响儿茶酚胺的代谢!而儿茶酚胺与抑郁症有关,因此,有人对体外培养的SH-SY5Y施加rTMS,探究rTMS可能存在的对抑郁症的影响

       [2]。该细胞还可以表达淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protern)和β淀粉样蛋白(β-amyloid )

       [3]。这个两种蛋白与AD的发病机制有关。

 

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