www.813.net-澳门十大信誉平台网站

您好!欢迎访问www.813.net网站!
全国服务咨询热线:

400-001-0304

当前位置:www.813.net > 技术文章 > 用帖壁法纯化巨噬细胞

用帖壁法纯化巨噬细胞

发表时间:2021-07-13  |  点击率:136

1. 用含 20 %~ 40 %小牛血清的 RPMI-1640 培养液将巨噬细胞配成 2 × 106 ~ 4 × 106 /ml 的浓度。以每平方厘米 2 × 105 ~ 4 × 105 个巨噬细胞的密度将细胞悬液接种到玻璃培养皿(瓶)或塑料培养皿(瓶)中。 37 ℃ 5 % CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养 1 小时或 24 小时。 1 小时培养节省时间但会丢失一些粘附力弱的巨噬细胞,而 24 小时可以得到较多的巨噬细胞。 20 %~ 40 %的小牛血清可以减少 B 淋巴细胞的粘附。

2. 摇晃培养皿(瓶),悬浮未粘附细胞,吸出细胞悬液。用预温的 Hanks 液洗涤细胞 3 ~ 4 次。悬浮细胞可重复粘附,得到更多巨噬细胞。用适量含 2.5mmol/L EDTA 的无钙镁 Hanks 液消化细胞 37 ℃ 15 ~ 30 分钟。用吸管吹打分离细胞,离心 250 × g 10 分钟,去上清液。

3. 用预冷的 Hanks 液洗涤细胞 3 ~ 4 次,每次离心 250 × g 10 分钟,去上清液。最后用含 10 %小牛血清的 RPMI-1640 培养液悬浮细胞,台盼蓝染色计数细胞并决定细胞活力,将细胞配成所需的浓度。


扫一扫,浏览手机站
地址:上海市浦东新区瑞庆路528号(张江高科现代医疗器械园) 传真:021-58989875*8002
©2021 www.813.net 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:
技术支撑:化工仪器网  管理登陆  sitemap.xml

www.813.net|澳门十大信誉平台网站

XML 地图 | Sitemap 地图
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站